En las salas blancas existen dos fuentes principales de contaminación: partículas y microorganismos, que pueden originarse por factores humanos y ambientales, o por actividades relacionadas con el proceso. A pesar de los mejores esfuerzos, la contaminación puede penetrar en la sala blanca. Entre los portadores de contaminación más comunes se encuentran los cuerpos humanos (células, cabello), factores ambientales como polvo, humo, niebla o equipos (de laboratorio y de limpieza), así como técnicas y métodos de limpieza inadecuados.
El principal vector de contaminación son las personas. Incluso con la vestimenta y los procedimientos operativos más rigurosos, los operarios mal capacitados representan la mayor amenaza de contaminación en las salas blancas. Los empleados que no siguen las directrices de la sala blanca constituyen un factor de alto riesgo. Un solo error u omisión por parte de un empleado puede contaminar toda la sala. La empresa solo puede garantizar la limpieza de la sala blanca mediante la monitorización continua y la actualización constante de la formación, con un índice de contaminación cero.
Otras fuentes importantes de contaminación son las herramientas y los equipos. Si un carro o una máquina solo se limpia superficialmente antes de entrar en la sala blanca, puede introducir microorganismos. A menudo, los trabajadores desconocen que los equipos con ruedas pasan por encima de superficies contaminadas al introducirlos en la sala blanca. Las superficies (incluidos suelos, paredes, equipos, etc.) se analizan rutinariamente para determinar el recuento de microorganismos viables mediante placas de contacto especialmente diseñadas que contienen medios de cultivo como el agar tripticasa de soja (TSA) y el agar dextrosa Sabouraud (SDA). El TSA es un medio de cultivo diseñado para bacterias, y el SDA es un medio de cultivo diseñado para mohos y levaduras. El TSA y el SDA se incuban normalmente a diferentes temperaturas: el TSA se expone a temperaturas de entre 30 y 35 °C, que es la temperatura óptima de crecimiento para la mayoría de las bacterias, y entre 20 y 25 °C es óptima para la mayoría de las especies de mohos y levaduras.
El flujo de aire fue en su momento una causa común de contaminación, pero los sistemas de climatización (HVAC) actuales para salas blancas la han eliminado prácticamente por completo. El aire en las salas blancas se controla y monitoriza regularmente (diariamente, semanalmente, trimestralmente, etc.) para medir el recuento de partículas, el recuento de microorganismos viables, la temperatura y la humedad. Se utilizan filtros HEPA para controlar el recuento de partículas en el aire, capaces de filtrar partículas de hasta 0,2 µm. Estos filtros suelen funcionar de forma continua a un caudal calibrado para mantener la calidad del aire en la sala. La humedad se mantiene generalmente a un nivel bajo para prevenir la proliferación de microorganismos como bacterias y moho, que prefieren los ambientes húmedos.
De hecho, el nivel más alto y la fuente más común de contaminación en una sala blanca es el propio operario.
Las fuentes y vías de entrada de contaminación no varían significativamente entre las distintas industrias, pero sí existen diferencias en cuanto a los niveles de contaminación tolerables e intolerables. Por ejemplo, los fabricantes de comprimidos ingeribles no necesitan mantener el mismo nivel de limpieza que los fabricantes de fármacos inyectables que se introducen directamente en el cuerpo humano.
Los fabricantes farmacéuticos tienen una menor tolerancia a la contaminación microbiana que los fabricantes de electrónica de alta tecnología. Los fabricantes de semiconductores que producen productos microscópicos no pueden aceptar ninguna contaminación por partículas para garantizar la funcionalidad del producto. Por lo tanto, estas empresas solo se preocupan por la esterilidad del producto que se implantará en el cuerpo humano y la funcionalidad del chip o teléfono móvil. Les preocupa relativamente menos el moho, los hongos u otras formas de contaminación microbiana en las salas blancas. En cambio, las empresas farmacéuticas se preocupan por todas las fuentes de contaminación, tanto vivas como muertas.
La industria farmacéutica está regulada por la FDA y debe cumplir estrictamente con las Buenas Prácticas de Fabricación (BPF), ya que las consecuencias de la contaminación son muy perjudiciales. Los fabricantes de medicamentos no solo deben garantizar que sus productos estén libres de bacterias, sino que también están obligados a documentar y rastrear todo el proceso. Una empresa de equipos de alta tecnología puede enviar una computadora portátil o un televisor siempre que supere su auditoría interna. Sin embargo, para la industria farmacéutica no es tan sencillo, por lo que es fundamental que las empresas cuenten con procedimientos operativos para salas blancas, los utilicen y los documenten. Debido a los costos, muchas empresas contratan servicios de limpieza profesionales externos.
Un programa integral de análisis ambiental para salas blancas debe incluir partículas visibles e invisibles en suspensión en el aire. Si bien no es obligatorio identificar todos los contaminantes en estos entornos controlados mediante microorganismos, el programa de control ambiental debe incluir un nivel adecuado de identificación bacteriana de las muestras extraídas. Actualmente existen numerosos métodos de identificación bacteriana.
El primer paso en la identificación bacteriana, especialmente en el aislamiento de salas blancas, es la tinción de Gram, ya que proporciona información valiosa sobre el origen de la contaminación microbiana. Si el aislamiento e identificación microbiana revela cocos Gram positivos, la contaminación podría provenir de humanos. Si revela bacilos Gram positivos, la contaminación podría provenir de polvo o cepas resistentes a desinfectantes. Si revela bacilos Gram negativos, la contaminación podría provenir de agua o cualquier superficie húmeda.
La identificación microbiana en salas blancas farmacéuticas es fundamental, ya que está relacionada con numerosos aspectos del control de calidad, como los bioensayos en entornos de fabricación; las pruebas de identificación bacteriana de productos finales; la detección de organismos no identificados en productos estériles y agua; el control de calidad de la tecnología de almacenamiento de fermentación en la industria biotecnológica; y la verificación de pruebas microbiológicas durante la validación. El método de la FDA para confirmar la supervivencia bacteriana en un entorno específico se generalizará cada vez más. Cuando los niveles de contaminación microbiana superan el límite establecido o los resultados de las pruebas de esterilidad indican contaminación, es necesario verificar la eficacia de los agentes de limpieza y desinfección e identificar las fuentes de contaminación.
Existen dos métodos para monitorizar las superficies ambientales de las salas blancas:
1. Placas de contacto
Estas placas de cultivo especiales contienen un medio de cultivo estéril, preparado de manera que sobresalga del borde de la placa. La tapa de la placa de contacto cubre la superficie a muestrear, y cualquier microorganismo visible en ella se adherirá a la superficie del agar y se incubará. Esta técnica permite cuantificar la cantidad de microorganismos presentes en una superficie.
2. Método del hisopo
Este material es estéril y se conserva en un líquido estéril adecuado. El hisopo se aplica a la superficie de prueba y el microorganismo se identifica al recuperarlo en el medio de cultivo. Los hisopos se utilizan con frecuencia en superficies irregulares o en áreas de difícil acceso para el muestreo con placas de contacto. El muestreo con hisopo es principalmente una prueba cualitativa.
Fecha de publicación: 21 de octubre de 2024