Existen dos fuentes principales de contaminación en una sala limpia: partículas y microorganismos, que pueden ser causadas por factores humanos y ambientales, o por actividades relacionadas con el proceso. A pesar de los mejores esfuerzos, la contaminación seguirá penetrando en la sala limpia. Los portadores comunes de contaminación incluyen el cuerpo humano (células, cabello), factores ambientales como polvo, humo, niebla o equipos (equipos de laboratorio, equipos de limpieza) y técnicas y métodos de limpieza inadecuados.
El principal vector de contaminación son las personas. Incluso con la vestimenta y los procedimientos operativos más rigurosos, los operadores con una capacitación inadecuada representan la mayor amenaza de contaminación en una sala limpia. Los empleados que no siguen las directrices de la sala limpia constituyen un factor de alto riesgo. Cualquier error u omisión de un empleado puede provocar la contaminación de toda la sala limpia. La empresa solo puede garantizar la limpieza de la sala limpia mediante la monitorización y actualización continuas de la capacitación, con una tasa de contaminación cero.
Otras fuentes importantes de contaminación son las herramientas y el equipo. Si un carro o una máquina se limpian bruscamente antes de entrar en la sala limpia, pueden introducir microorganismos. A menudo, los trabajadores desconocen que el equipo con ruedas rueda sobre superficies contaminadas al introducirse en la sala limpia. Las superficies (incluidos suelos, paredes, equipos, etc.) se analizan rutinariamente para determinar el recuento de microorganismos viables utilizando placas de contacto especialmente diseñadas que contienen medios de cultivo como el agar tripticasa de soja (TSA) y el agar dextrosa Sabouraud (SDA). El TSA es un medio de cultivo diseñado para bacterias, y el SDA es un medio de cultivo diseñado para mohos y levaduras. El TSA y el SDA suelen incubarse a diferentes temperaturas, con el TSA expuesto a temperaturas en el rango de 30 a 35 °C, que es la temperatura óptima de crecimiento para la mayoría de las bacterias. El rango de 20 a 25 °C es óptimo para la mayoría de las especies de mohos y levaduras.
El flujo de aire solía ser una causa común de contaminación, pero los sistemas actuales de climatización (HVAC) para salas blancas prácticamente la han eliminado. El aire en la sala blanca se controla y monitorea regularmente (por ejemplo, diaria, semanal o trimestralmente) para el recuento de partículas, el recuento de viables, la temperatura y la humedad. Se utilizan filtros HEPA para controlar el recuento de partículas en el aire y tienen la capacidad de filtrar partículas de hasta 0,2 µm. Estos filtros suelen funcionar continuamente a un caudal calibrado para mantener la calidad del aire en la sala. La humedad suele mantenerse baja para evitar la proliferación de microorganismos como bacterias y moho, que prefieren ambientes húmedos.
De hecho, la fuente de contaminación más común y de mayor nivel en una sala limpia es el operador.
Las fuentes y vías de entrada de la contaminación no varían significativamente entre industrias, pero existen diferencias entre ellas en cuanto a los niveles tolerables e intolerables de contaminación. Por ejemplo, los fabricantes de comprimidos ingeribles no necesitan mantener el mismo nivel de limpieza que los fabricantes de agentes inyectables que se introducen directamente en el cuerpo humano.
Los fabricantes farmacéuticos tienen menor tolerancia a la contaminación microbiana que los fabricantes de electrónica de alta tecnología. Los fabricantes de semiconductores que producen productos microscópicos no pueden aceptar ninguna contaminación por partículas para garantizar la funcionalidad del producto. Por lo tanto, a estas empresas solo les preocupa la esterilidad del producto que se implantará en el cuerpo humano y la funcionalidad del chip o teléfono móvil. Les preocupa relativamente menos el moho, los hongos u otras formas de contaminación microbiana en salas blancas. Por otro lado, las compañías farmacéuticas se preocupan por todas las fuentes de contaminación, tanto vivas como muertas.
La industria farmacéutica está regulada por la FDA y debe seguir estrictamente las Buenas Prácticas de Manufactura (BPM), ya que las consecuencias de la contaminación en este sector son muy perjudiciales. Los fabricantes de medicamentos no solo deben garantizar que sus productos estén libres de bacterias, sino que también deben documentar y realizar un seguimiento de todo. Una empresa de equipos de alta tecnología puede enviar una computadora portátil o un televisor siempre que supere una auditoría interna. Sin embargo, esto no es tan sencillo para la industria farmacéutica, por lo que es crucial que una empresa cuente con, utilice y documente los procedimientos operativos de salas blancas. Debido a consideraciones de costo, muchas empresas contratan servicios de limpieza profesionales externos.
Un programa integral de análisis ambiental de salas blancas debe incluir la detección de partículas visibles e invisibles en el aire. Si bien no es obligatorio que todos los contaminantes en estos entornos controlados se identifiquen mediante microorganismos, el programa de control ambiental debe incluir un nivel adecuado de identificación bacteriana de las extracciones de muestras. Actualmente existen numerosos métodos de identificación bacteriana.
El primer paso en la identificación bacteriana, especialmente en el aislamiento de salas blancas, es la tinción de Gram, ya que puede proporcionar pistas interpretativas sobre el origen de la contaminación microbiana. Si el aislamiento y la identificación microbiana muestran cocos grampositivos, la contaminación podría provenir de humanos. Si el aislamiento y la identificación microbiana muestran bacilos grampositivos, la contaminación podría provenir de polvo o cepas resistentes a los desinfectantes. Si el aislamiento y la identificación microbiana muestran bacilos gramnegativos, la fuente de contaminación podría provenir del agua o de cualquier superficie húmeda.
La identificación microbiana en salas blancas farmacéuticas es fundamental, ya que está relacionada con diversos aspectos del control de calidad, como los bioensayos en entornos de fabricación; las pruebas de identificación bacteriana de productos finales; la detección de organismos no identificados en productos estériles y agua; el control de calidad de la tecnología de almacenamiento por fermentación en la industria biotecnológica; y la verificación de pruebas microbianas durante la validación. El método de la FDA para confirmar la supervivencia de las bacterias en un entorno específico será cada vez más común. Cuando los niveles de contaminación microbiana superan el nivel especificado o los resultados de las pruebas de esterilidad indican contaminación, es necesario verificar la eficacia de los agentes de limpieza y desinfección y descartar la identificación de fuentes de contaminación.
Existen dos métodos para monitorear las superficies ambientales de las salas limpias:
1. Placas de contacto
Estas placas de cultivo especiales contienen medio de cultivo estéril, preparado para que supere el borde de la placa. La cubierta de la placa de contacto cubre la superficie a muestrear, y cualquier microorganismo visible en ella se adherirá a la superficie de agar y se incubará. Esta técnica permite mostrar la cantidad de microorganismos visibles en una superficie.
2. Método del hisopo
Este es estéril y se almacena en un líquido estéril adecuado. El hisopo se aplica a la superficie de prueba y el microorganismo se identifica recogiéndolo en el medio. Los hisopos se utilizan a menudo en superficies irregulares o en zonas difíciles de muestrear con una placa de contacto. El muestreo con hisopo es más bien una prueba cualitativa.
Hora de publicación: 21 de octubre de 2024