Hay dos fuentes principales de contaminación en las salas blancas: partículas y microorganismos, que pueden ser causadas por factores humanos y ambientales, o actividades relacionadas en el proceso. A pesar de los mejores esfuerzos, la contaminación seguirá penetrando en la sala limpia. Los portadores de contaminación comunes específicos incluyen cuerpos humanos (células, cabello), factores ambientales como polvo, humo, niebla o equipos (equipos de laboratorio, equipos de limpieza) y técnicas y métodos de limpieza inadecuados.
El portador de contaminación más común son las personas. Incluso con la ropa más estricta y los procedimientos operativos más estrictos, los operadores mal capacitados son la mayor amenaza de contaminación en las salas blancas. Los empleados que no siguen las pautas de la sala limpia son un factor de alto riesgo. Siempre que un empleado cometa un error u olvide un paso, se contaminará toda la sala blanca. La empresa sólo puede garantizar la limpieza de la sala blanca mediante un seguimiento continuo y una actualización continua de la formación con una tasa de contaminación cero.
Otras fuentes importantes de contaminación son las herramientas y equipos. Si un carro o una máquina se limpian sólo de forma brusca antes de entrar en la sala blanca, pueden introducirse microorganismos. A menudo, los trabajadores no son conscientes de que los equipos con ruedas ruedan sobre superficies contaminadas cuando son empujados hacia la sala limpia. Las superficies (incluidos pisos, paredes, equipos, etc.) se analizan de forma rutinaria para determinar recuentos viables utilizando placas de contacto especialmente diseñadas que contienen medios de crecimiento como Trypticase Soy Agar (TSA) y Sabouraud Dextrose Agar (SDA). TSA es un medio de crecimiento diseñado para bacterias y SDA es un medio de crecimiento diseñado para mohos y levaduras. TSA y SDA generalmente se incuban a diferentes temperaturas, con TSA expuesta a temperaturas en el rango de 30-35˚C, que es la temperatura de crecimiento óptima para la mayoría de las bacterias. El rango de 20-25˚C es óptimo para la mayoría de las especies de mohos y levaduras.
El flujo de aire alguna vez fue una causa común de contaminación, pero los sistemas HVAC de salas blancas actuales prácticamente han eliminado la contaminación del aire. El aire en la sala limpia se controla y monitorea periódicamente (p. ej., diariamente, semanalmente, trimestralmente) para determinar el recuento de partículas, el recuento de viables, la temperatura y la humedad. Los filtros HEPA se utilizan para controlar el recuento de partículas en el aire y tienen la capacidad de filtrar partículas de hasta 0,2 µm. Estos filtros generalmente se mantienen funcionando continuamente a un caudal calibrado para mantener la calidad del aire en la habitación. La humedad suele mantenerse a un nivel bajo para evitar la proliferación de microorganismos como bacterias y moho que prefieren los ambientes húmedos.
De hecho, el nivel más alto y la fuente más común de contaminación en una sala limpia es el operador.
Las fuentes y rutas de entrada de la contaminación no varían significativamente de una industria a otra, pero existen diferencias entre industrias en términos de niveles tolerables e intolerables de contaminación. Por ejemplo, los fabricantes de tabletas ingeribles no necesitan mantener el mismo nivel de limpieza que los fabricantes de agentes inyectables que se introducen directamente en el cuerpo humano.
Los fabricantes farmacéuticos tienen una menor tolerancia a la contaminación microbiana que los fabricantes de productos electrónicos de alta tecnología. Los fabricantes de semiconductores que producen productos microscópicos no pueden aceptar ninguna contaminación por partículas para garantizar la funcionalidad del producto. Por tanto, a estas empresas sólo les preocupa la esterilidad del producto a implantar en el cuerpo humano y la funcionalidad del chip o teléfono móvil. Están relativamente menos preocupados por el moho, los hongos u otras formas de contaminación microbiana en las salas blancas. Por otro lado, las empresas farmacéuticas están preocupadas por todas las fuentes de contaminación, tanto vivas como muertas.
La industria farmacéutica está regulada por la FDA y debe seguir estrictamente las regulaciones de Buenas Prácticas de Manufactura (GMP) porque las consecuencias de la contaminación en la industria farmacéutica son muy dañinas. Los fabricantes de medicamentos no sólo deben asegurarse de que sus productos estén libres de bacterias, sino que también deben tener documentación y seguimiento de todo. Una empresa de equipos de alta tecnología puede enviar una computadora portátil o un televisor siempre que pase su auditoría interna. Pero no es tan sencillo para la industria farmacéutica, por lo que es crucial que una empresa tenga, utilice y documente procedimientos operativos de sala blanca. Debido a consideraciones de costos, muchas empresas contratan servicios de limpieza profesionales externos para realizar servicios de limpieza.
Un programa integral de pruebas ambientales de salas blancas debe incluir partículas visibles e invisibles en el aire. Aunque no existe ningún requisito de que todos los contaminantes en estos ambientes controlados sean identificados por microorganismos. El programa de control ambiental debe incluir un nivel apropiado de identificación bacteriana de las extracciones de muestras. Actualmente existen muchos métodos de identificación bacteriana disponibles.
El primer paso en la identificación bacteriana, especialmente cuando se trata del aislamiento en salas blancas, es el método de tinción de Gram, ya que puede proporcionar pistas interpretativas sobre la fuente de contaminación microbiana. Si el aislamiento y la identificación microbiana muestran cocos grampositivos, la contaminación puede provenir de humanos. Si el aislamiento y la identificación microbiana muestran bacilos grampositivos, la contaminación puede provenir del polvo o de cepas resistentes a los desinfectantes. Si el aislamiento y la identificación microbiana muestran bacilos Gram negativos, la fuente de contaminación puede haber provenido del agua o de cualquier superficie húmeda.
La identificación microbiana en salas blancas farmacéuticas es muy necesaria porque está relacionada con muchos aspectos del aseguramiento de la calidad, como los bioensayos en entornos de fabricación; pruebas de identificación bacteriana de productos finales; organismos sin nombre en productos estériles y agua; control de calidad de la tecnología de almacenamiento de fermentación en la industria biotecnológica; y verificación de pruebas microbianas durante la validación. El método de la FDA para confirmar que las bacterias pueden sobrevivir en un entorno específico será cada vez más común. Cuando los niveles de contaminación microbiana exceden el nivel especificado o los resultados de las pruebas de esterilidad indican contaminación, es necesario verificar la efectividad de los agentes de limpieza y desinfección y eliminar la identificación de fuentes de contaminación.
Existen dos métodos para monitorear las superficies ambientales de las salas blancas:
1. Placas de contacto
Estos platos de cultivo especiales contienen medio de crecimiento estéril, que se prepara para que esté más alto que el borde del plato. La cubierta de la placa de contacto cubre la superficie de la que se va a tomar la muestra y cualquier microorganismo visible en la superficie se adherirá a la superficie del agar y se incubará. Esta técnica puede mostrar la cantidad de microorganismos visibles en una superficie.
2. Método de hisopo
Es estéril y se almacena en un líquido estéril adecuado. El hisopo se aplica a la superficie de prueba y el microorganismo se identifica recuperando el hisopo en el medio. Los hisopos se utilizan a menudo en superficies irregulares o en áreas en las que es difícil tomar muestras con una placa de contacto. El muestreo con hisopo es más una prueba cualitativa.
Hora de publicación: 21 de octubre de 2024