En las salas blancas, existen dos fuentes principales de contaminación: partículas y microorganismos, que pueden ser causadas por factores humanos y ambientales, o por actividades relacionadas con el proceso. A pesar de los mejores esfuerzos, la contaminación seguirá penetrando en la sala blanca. Entre los portadores de contaminación más comunes se incluyen cuerpos humanos (células, cabello), factores ambientales como polvo, humo, neblina o equipos (equipos de laboratorio, equipos de limpieza) y técnicas de limpieza y métodos de secado inadecuados.
El principal agente contaminante son las personas. Incluso con la vestimenta y los procedimientos operativos más rigurosos, los operarios mal capacitados representan la mayor amenaza de contaminación en las salas blancas. Los empleados que no siguen las directrices de la sala blanca constituyen un factor de alto riesgo. Un solo error u omisión puede provocar la contaminación de toda la sala blanca. La empresa solo puede garantizar la limpieza de la sala blanca mediante la monitorización continua y la actualización constante de la formación, logrando así una tasa de contaminación cero.
Otras fuentes importantes de contaminación son las herramientas y los equipos. Si un carro o una máquina solo se limpia superficialmente antes de entrar en la sala limpia, puede introducir microorganismos. A menudo, los trabajadores desconocen que los equipos con ruedas pasan por encima de superficies contaminadas al ser introducidos en la sala limpia. Las superficies (incluidos suelos, paredes, equipos, etc.) se analizan de forma rutinaria para determinar el recuento de microorganismos viables mediante placas de contacto especialmente diseñadas que contienen medios de cultivo como el agar tripticasa de soja (TSA) y el agar dextrosa de Sabouraud (SDA). El TSA es un medio de cultivo diseñado para bacterias, y el SDA es un medio de cultivo diseñado para mohos y levaduras. El TSA y el SDA se incuban normalmente a diferentes temperaturas; el TSA se expone a temperaturas de entre 30 y 35 °C, que es la temperatura óptima de crecimiento para la mayoría de las bacterias. El rango de 20 a 25 °C es óptimo para la mayoría de las especies de mohos y levaduras.
El flujo de aire solía ser una causa común de contaminación, pero los sistemas HVAC actuales para salas blancas prácticamente la han eliminado. El aire en las salas blancas se controla y monitoriza periódicamente (por ejemplo, a diario, semanalmente o trimestralmente) para medir el recuento de partículas, el recuento de microorganismos viables, la temperatura y la humedad. Se utilizan filtros HEPA para controlar el recuento de partículas en el aire, capaces de filtrar partículas de hasta 0,2 µm. Estos filtros suelen funcionar de forma continua a un caudal calibrado para mantener la calidad del aire en la sala. La humedad se mantiene generalmente en un nivel bajo para prevenir la proliferación de microorganismos como bacterias y moho, que prefieren los ambientes húmedos.
De hecho, la fuente de contaminación más frecuente y de mayor nivel en una sala limpia es el propio operario.
Las fuentes y las vías de entrada de la contaminación no varían significativamente entre las distintas industrias, pero sí existen diferencias en cuanto a los niveles de contaminación tolerables e intolerables. Por ejemplo, los fabricantes de comprimidos ingeribles no necesitan mantener el mismo nivel de limpieza que los fabricantes de agentes inyectables que se introducen directamente en el cuerpo humano.
Los fabricantes farmacéuticos tienen una menor tolerancia a la contaminación microbiana que los fabricantes de electrónica de alta tecnología. Los fabricantes de semiconductores, que producen componentes microscópicos, no pueden aceptar ninguna contaminación por partículas para garantizar la funcionalidad del producto. Por lo tanto, estas empresas solo se preocupan por la esterilidad del producto que se implantará en el cuerpo humano y por la funcionalidad del chip o del teléfono móvil. Les preocupa relativamente menos el moho, los hongos u otras formas de contaminación microbiana en las salas blancas. Por otro lado, a las empresas farmacéuticas les preocupan todas las fuentes de contaminación, tanto vivas como muertas.
La industria farmacéutica está regulada por la FDA y debe cumplir estrictamente con las Buenas Prácticas de Fabricación (BPF), ya que las consecuencias de la contaminación en este sector son muy perjudiciales. Los fabricantes de medicamentos no solo deben garantizar que sus productos estén libres de bacterias, sino que también deben documentar y realizar un seguimiento exhaustivo de todo. Una empresa de equipos de alta tecnología puede enviar un portátil o un televisor siempre que supere su auditoría interna. Sin embargo, para la industria farmacéutica no es tan sencillo, por lo que resulta crucial que una empresa cuente con procedimientos operativos para salas blancas, los utilice y los documente. Debido a consideraciones de costes, muchas empresas contratan servicios de limpieza profesionales externos.
Un programa integral de análisis ambiental para salas blancas debe incluir la identificación de partículas en suspensión, tanto visibles como invisibles. Si bien no es obligatorio identificar todos los contaminantes en estos entornos controlados mediante microorganismos, el programa de control ambiental debe incluir un nivel adecuado de identificación bacteriana de las muestras extraídas. Actualmente existen numerosos métodos de identificación bacteriana disponibles.
El primer paso en la identificación bacteriana, especialmente en el aislamiento de salas blancas, es la tinción de Gram, ya que proporciona pistas para interpretar el origen de la contaminación microbiana. Si el aislamiento e identificación microbiana muestra cocos Gram positivos, la contaminación podría provenir de humanos. Si muestra bacilos Gram positivos, la contaminación podría provenir del polvo o de cepas resistentes a desinfectantes. Si muestra bacilos Gram negativos, la contaminación podría provenir del agua o de cualquier superficie húmeda.
La identificación microbiana en salas blancas farmacéuticas es fundamental, ya que está relacionada con numerosos aspectos del control de calidad, como los bioensayos en entornos de fabricación; las pruebas de identificación bacteriana de productos finales; la detección de microorganismos no identificados en productos estériles y agua; el control de calidad de la tecnología de almacenamiento por fermentación en la industria biotecnológica; y la verificación de pruebas microbiológicas durante la validación. El método de la FDA para confirmar la supervivencia bacteriana en un entorno específico se generalizará. Cuando los niveles de contaminación microbiana superan el límite establecido o los resultados de las pruebas de esterilidad indican contaminación, es necesario verificar la eficacia de los agentes de limpieza y desinfección, así como eliminar las fuentes de contaminación.
Existen dos métodos para monitorizar las superficies ambientales de las salas blancas:
1. Placas de contacto
Estas placas de cultivo especiales contienen un medio de cultivo estéril, preparado para que sobresalga del borde de la placa. La tapa de la placa de contacto cubre la superficie que se va a muestrear, y cualquier microorganismo visible en ella se adherirá al agar y se incubará. Esta técnica permite determinar la cantidad de microorganismos visibles en una superficie.
2. Método del hisopo
Este material es estéril y se almacena en un líquido estéril adecuado. El hisopo se aplica a la superficie de prueba y el microorganismo se identifica al recuperar el hisopo en el medio. Los hisopos se utilizan con frecuencia en superficies irregulares o en áreas de difícil acceso para el muestreo con una placa de contacto. El muestreo con hisopo es principalmente una prueba cualitativa.
Fecha de publicación: 21 de octubre de 2024